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卫生检疫总所


中华人民共和国卫生检疫总所关于印发《国境卫生检疫检验 方法≥和《国境卫生检疫检验规程≥（试行）的通知


　　　　　　　　　 （卫检总监字〔１９８９〕第２３５号

　　　　　　　　　　　　１９８９年１２月６日）

各卫生检疫所：

　　为加强国境卫生检疫检验工作，使其科学化、规范化、标准化，我们组织有关专业人员，整理了《国境卫生检疫检验方法≥和制定了《国境卫生检疫检验规程≥（试行），现发给你们参照执行。望总结经验并将执行过程中遇到的问题和改进意见及时报总所。

　　　　　　　　　　　　　国境卫生检疫检验方法

　　　　　　　　　　　　　　　　　目录

一、健康检查检验方法

　　（一）ＡＢＯ血型检验方法

　　（二）谷丙转氨酶检验方法

　　（三）乙肝表面抗原检验方法

　　（四）食品饮用水从业人员带菌检查检验方法

　　（五）腹泻病病原体检验方法

　　（六）红细胞沉降率检验方法

二、禁止入境的传染病检验方法

　　（一）梅毒血清抗体检验方法

　　（二）淋病双球菌检验方法

　　（三）结核杆菌检验方法

　　（四）麻疯杆菌检验方法

　　（五）艾滋病血清抗体检验方法（ＨＩＶ检验方法）

三、检疫传染病检验方法

　　（一）鼠疫耶尔森氏菌检验方法

　　（二）霍乱弧菌检验方法

　　（三）黄热病病毒检验方法

四、监测传染病检验方法

　　（一）流感病毒检验方法

　　（二）疟原虫检验方法

　　（三）斑疹伤寒立克次体检验方法

　　（四）回归热螺旋体检验方法

　　（五）登革热病毒检验方法

　　（六）流行性出血热病毒检验方法

　　（七）脊髓灰质炎病毒检验方法

　　（八）天花病毒检验方法

　　（九）埃波拉马尔堡病毒检验方法

　　（十）拉沙热病毒检验方法

　　（十一）军团菌检验方法

五、食品卫生检验方法和标准（详见《中华人民共和国食品卫生标准≥）

　　（一）粮食卫生标准

　　（二）食用植物油卫生标准

　　（三）鲜肉卫生标准

　　（四）冻肉卫生标准

　　（五）咸肉卫生标准

　　（六）熟肉制品卫生标准

　　（七）鲜蛋卫生标准

　　（八）加工蛋制品卫生标准

　　（九）乳及乳制品卫生标准

　　（十）茶类卫生标准

　　（十一）糖类卫生标准　

　　（十二）糕点、饼干、面包卫生标准

　　（十三）冷饮食品及汽酒卫生标准

　　（十四）罐头卫生标准

　　（十五）水产品卫生标准

　　（十六）调味品卫生标准

　　（十七）酱腌菜卫生标准

　　（十八）豆制品及淀粉类卫生标准

　　（十九）蒸馏酒及配制酒卫生标准

　　（二十）发酵酒卫生标准

　　（二十一）食品添加剂使用卫生标准

　　（二十二）食品中氟允许量标准

　　（二十三）食品中镉允许量标准

　　（二十四）食品总砷、无机砷允许量标准

　　（二十五）食品中汞允许量标准

　　（二十六）粮食、蔬菜、肉、蛋等食品中“六六六”“滴滴涕”卫生标准

　　（二十七）食品中甲拌磷、希螟硫磷、倍硫磷残留量卫生标准

　　（二十八）食品中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷允许残留标准

　　（二十九）食品中黄曲霉毒素Ｂ１允许量标准

　　（三十）熏烤动物性食品中苯并芘允许限量标准

　　（三十一）食具容器包装材料卫生标准

六、餐茶具卫生检验方法

七、生活饮用水卫生要求

八、食品贮藏卫生要求

九、环境卫生要求

　　（一）污水排放卫生要求

　　（二）空气卫生要求

　　（三）餐茶具洗涤消毒卫生要求

　　（四）供水设备卫生要求

　　　　　　　　　　　一、健康检查检验方法

　　（一）ＡＢＯ血型检验方法

　　１、方法

　　　　玻片凝集法

　　　　标准血清系指用抗Ａ抗Ｂ单克隆标准抗血清

　　２、结果判定

────────────┬───────────────────────

　　标准血清　　　　　　│　　　　　凝集现象

────────────┼───────────────────────

　　抗Ａ　　　　　　　　│＋　　　　－　　　　＋　　　　－

　　抗Ｂ　　　　　　　　│－　　　　＋　　　　＋　　　　－

　　受检者血型　　　　　│Ａ　　　　Ｂ　　　　ＡＢ　　　Ｏ

────────────┴───────────────────────

　　　　　　　＋凝集　＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿　 －不凝集

────────────────────────────────────

　　（二）谷丙转氨酶检验方法

　　１　方法

　　　　ＧＰＴ赖氏法

　　２　结果判定

　

────────────┬───────────────────────

　　方法　　　　　　　　│正常值

────────────┼───────────────────────

　　赖氏法　　　　　　　│０－２５单位

────────────┴───────────────────────

　 （三）乙型肝炎表面抗原检验方法

　　１　方法

　　１．１　酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）

　　１．２　反向间接血凝反应（ＲＰＨＡ）

　　２　结果判定

───┬────────────────────┬───────────

方法　│　　　 血球凝集反应　　　　　　　　　　 │

　　　├────────────────────┤结果判定

　　　│１：２　　１：４　　１：８　　１：８以上│

───┼────────────────────┼───────────

反向间│＋＋↑　　＋＋↑　　＋＋↑　　＋＋↑　　│阳性（＋＋）

接血凝│＋＋↑　　＋＋↑　　＋＋↑　　＋↓　　　│可疑（＋－）

反应　│＋＋↑　　＋＋↑　　＋↓　　　－　　　　│阴性（－）

───┴────────────────────┴───────────

　　　　＋凝集　　 ↑以上　　　↓以下

　　　　必要时作中和试验

────────┬────────────────┬──────────

　　方法　　　　│　　　 判定方法　　　　　　　　 │结果判定

────────┼────────────────┼──────────

酶联免吸附试验　│目测：棕黄色　　　　　　　　　　│阳性

　　　　　　　　│比色：　　　　　　　　　　　　　│≥２．１：阳性

　　　　　　　　│　　　样品ＯＤ值　　　　　　　　│＜２．１：阴性

　　　　　　　　│ＰＮ＝─────────────│

　　　　　　　　│　　　阴性对照平均ＯＤ值　　　　│

────────┴────────────────┴──────────

　　（四）食品饮用水从业人员带菌检查检验方法

　　１　项目

　　　　霍乱弧菌、志贺氏菌、沙门氏菌

　　２　方法

　　　　增菌，分离培养，生化学、血清学鉴定

　　３　结果

　　　　不得检出

　　（五）腹泻病病原体检验方法

　　１　项目

　　霍乱弧菌、志贺氏菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌、致病性大肠杆菌、侵袭性大肠杆菌、产毒性大肠杆菌、空肠弯曲菌、结肠炎耶尔森氏菌、轮状病毒

　　２　方法

　　增菌、分离、培养、鉴定

　　３　结果

　　检出××病原体；××病原体未检出。

　　（六）红细胞沉降率检验方法

　　１　方法

　　魏氏法

　　２　结果判定

────────┬───────────────────────────

　　方法　　　　│正常检验指标

────────┼───────────────────────────

　　魏氏法　　　│男性　０－１５ｍｍ／ｈ

　　　　　　　　│女性　０－２０ｍｍ／ｈ

────────┴───────────────────────────

　　　　　　　　　　　二、禁止入境的传染病检验方法

　　（一）梅毒血清抗体检验方法

　　１　方法

　　１．１　血清反应素试验（ＵＳＲ）

　　１．２　梅毒螺旋体血凝试验（ＴＰＨＡ）

　　１．３　荧光螺旋体抗体吸收试验（ＦＴＡ－ＡＢＳ）

　　２　结果判定

　　２．１　ＵＳＲ

────────────────────────────────────

　　反应程度　　　　　　　　　　　　　　　　　结果判定

────────────────────────────────────

　　中等或大的块状物　　　　　　　　　　　阳性反应（＋＋）↑

　　颗粒不规则细小粒状　　　　　　　　　　弱阳性反应（＋－）

　　均匀分布无块状物　　　　　　　　　　　阴性反应（－）

────────────────────────────────────

　　２．２　ＴＰＨＡ

────────────────────────────────────

　　阳性　　　　　　　　　　　　　　　＞１：８０

　　可疑　　　　　　　　　　　　　　　１：８０（＋－）需复验

　　阴性　　　　　　　　　　　　　　　＜１：８０

────────────────────────────────────

　　２．３　ＦＴＡ－ＡＢＳ

────────────────────────────────────

　　荧光强度　　　　　　　　　　　　　　　　　结果判定

────────────────────────────────────

　　翠绿色荧光（＋＋）↑　　　　　　　　　　　　阳性

　　黄绿色荧光（＋）　　　　　　　　　　　　　　可疑

　　荧光不显（＋－）　　　　　　　　　　　　　　阴性

────────────────────────────────────

　　健康检查ＵＳＲ阳性时，需做ＴＰＨＡ，阳性时才能确诊。

　　（二）淋病双球菌检验方法

　　１　方法

　　１．１　直接涂片染色镜检

　　１．２　分离培养

　　１．３　生化试验鉴定

　　２　结果判定

　　２．１　形态特点：卵圆形或圆形，成对排列常位于细胞中。

　　２．２　菌落半透明灰白色边缘花瓣状。

　　２．３　生化试验：过氧化氢酶，氧化酶阳性葡萄糖产酸即可判定。

　　（三）结核杆菌检验方法

　　１　方法

　　１．１　直接涂片抗酸染色镜检

　　１．２　分离培养

　　１．３　动物试验

　　２　结果判定

　　２．１　检出抗酸性菌。

　　２．２　３－４周生长粗糙型菌落为阳性。

　　２．３　动物试验３－４周接种部位附近淋巴结肿大为阳性。

　　（四）麻疯杆菌检验方法

　　１　方法

　　１．１　直接涂片抗酸染色镜检１００个视野

　　１．２　动物试验

　　１．３　麻疯菌素反应

　　２　结果判定

　　２．１　镜检结果

　　２．１．１　阴性（－）：检查１００个视野无麻疯杆菌。

　　２．１．２　阳性（＋）：每个视野查到１个或＜１个麻疯杆菌。

　　２．１．３　阳性（＋＋）：每个视野均可查到麻疯杆菌。

　　２．１．４　阳性（＋＋＋）：每个视野均可查到许多麻疯杆菌。

　　２．２　动物试验：豚鼠接种不发病。

　　２．３　麻疯菌素反应：出现红斑＞１０ｍｍ为阳性。

　　（五）艾滋病血清抗体检验方法

　　１　项目

　　ＨＩＶ抗体检测

　　２　方法

　　２．１　酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）

　　２．２　间接免疫荧光试验（ＩＦＡ）

　　２．３　明胶颗粒凝集试验（ＰＡ）

　　２．４　蛋白印迹试验（ＷＢ）

　　３　结果判定

　　３．１　ＥＬＩＳＡ：ＯＤ值≥ｃｏｔ　ｏｆｆ值表示有反应，应复验１次，如重复阳性，可认为ＨＩＶ抗体阳性。

　　３．２　ＩＦＡ：细胞浆和细胞膜呈绿色荧光为阳性。

　　３．３　ＰＡ：

────────────────────────────────────

　　阳性（＋）　　　　　　　　　　　　１：３２　发生颗粒凝集

　　可疑（＋－）　　　　　　　　　　　＜１：３２　颗粒凝集不显

　　阴性（－）　　　　　　　　　　　　均不发生凝集反应

────────────────────────────────────

　　３．４　ＷＢ：出现Ｐ２４或ｇＰ４１带形，同时出现其他带形，为阳性，即可确诊。

　　　　　　　　　　　　 三、检疫传染病检验方法

　　（一）鼠疫耶尔森氏菌检验方法

　　１　方法

　　１．１　涂片镜检

　　１．２　分离培养鉴定

　　１．３　噬菌体试验

　　１．４　动物试验

　　１．５　沉淀反应

　　１．６　被动血凝试验

　　１．７　反向血凝试验

　　１．８　抗体中和试验

　　１．９　免疫荧光检查

　　２　结果报告

　　２．１　初报：２小时内涂片染色报告。

　　２．２　疑似报告：３６小时内报告形态、血清学试验、噬菌体试验结果。

　　２．３　最终报告：初发鼠疫于７２小时内经四步检查结果报告。

　　（二）霍乱弧菌检验方法

　　１　方法

　　１．１　涂片、染色

　　１．２　动力观察及制动试验

　　１．３　分离培养

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